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MuM-2C 人侵襲性脈絡膜黑色素瘤細胞

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所在地區:湖北 時間:2024-01-08【加入收藏夾】【關閉

貨源介紹

  細胞名稱MuM-2C(人侵襲性脈絡膜黑色素瘤細胞)

  STR檢測發現,MuM-2C細胞與人低侵襲性脈絡膜黑色素瘤細胞OCM-1A為同一遺傳背景,懷疑存在交叉污染。

  種屬:人

  年齡(性別)

  組織來源

  生長特性:貼壁

  細胞形態:多角形

  生長培養基:RPMI-1640+10%FBS+1%P/S

  培養條件氣相:空氣,95%;CO2,5%溫度:37℃

  細胞處理:

  1)凍存細胞的復蘇:

  將含有1mL細胞懸液的凍存管在37℃水浴中迅速搖晃解凍,加入到含4-6mL完全培養基的離心管中混合均勻。在1000RPM條件下離心3-5min,棄去上清液,完全培養基重懸細胞。然后將細胞懸液加入含6-8ml完全培養基的培養瓶(或皿)中37℃培養過夜。第二天顯微鏡下觀察細胞生長情況和細胞密度。

  2)細胞傳代:如果細胞密度達80%-90%,即可進行傳代培養。

  對于貼壁細胞傳代可以參考以下方法:

  1.棄去培養上清,用不含鈣、鎂離子的PBS潤洗細胞1-2次。

  2.加入0.25%(w/v)胰蛋白酶-0.53 mM EDTA于培養瓶中(T25瓶1-2mL,T75瓶2-3mL),置于37℃培養箱中消化1-2分鐘(難消化的細胞可以適當延長消化時間),然后在顯微鏡下觀察細胞消化情況,若細胞大部分變圓并脫落,迅速拿回操作臺,輕敲幾下培養瓶后加入3-4ml含10%FBS的培養基來終止消化。

  3.輕輕打勻后吸出,在1000RPM條件下離心3-5min,棄去上清液,補加1-2mL培養液后吹勻。將細胞懸液按1:2的比例分到新T25瓶中,添加6-8ml按照說明書要求配置的新的完全培養基以保持細胞的生長活力,后續傳代根據實際情況按1:2~1:5的比例進行。

  3)細胞凍存:收到細胞后建議在培養前3代時凍存一批細胞種子以備后續實驗使用。

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