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貨源介紹

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　　名稱:B16-F10(小鼠皮膚黑色素瘤細(xì)胞)(STR鑒定正確)

　　別稱:B16/F10;B16 F10;B16F10;B16 melanoma F10

　　種屬:小鼠

　　組織來(lái)源器官：皮膚；品系：C57BL/6J；疾病：黑色素瘤

　　生長(zhǎng)特性:貼壁細(xì)胞

　　細(xì)胞形態(tài):成纖維細(xì)胞樣

　　背景描述:B16-F10細(xì)胞是B16-F0細(xì)胞的亞系。

　　生物安全等級(jí):1

　　生長(zhǎng)培養(yǎng)基:RPMI-1640＋10%FBS＋1%P/S

　　推薦傳代比例:1:3-1:4

　　推薦換液頻率:2~3次/周

　　凍存條件

　　凍存液：55%基礎(chǔ)培養(yǎng)基+40%FBS+5%DMSO

　　溫度：液氮

　　培養(yǎng)條件

　　氣相：空氣，95%；CO2，5%

　　溫度：37℃

　　保藏機(jī)構(gòu)ATCC;CRL-6475

　　運(yùn)輸和保存

　　干冰運(yùn)輸及復(fù)蘇好存活細(xì)胞

　　（1）1mL凍存管包裝干冰運(yùn)輸，收到后-80度冰箱保存過(guò)夜后轉(zhuǎn)入液氮或直接復(fù)蘇，若發(fā)現(xiàn)干冰已揮發(fā)干凈、凍存管瓶蓋脫落、破損及細(xì)胞有污染，請(qǐng)立即與我們聯(lián)系。

　　（2）T25瓶復(fù)蘇的存活細(xì)胞常溫發(fā)貨，收到后按照細(xì)胞接收后的處理方法操作。

　　細(xì)胞接收后的處理：

　　1）收到細(xì)胞后，75%酒精消毒瓶壁將T25瓶置于37℃培養(yǎng)箱放置約2-3h，若發(fā)現(xiàn)培養(yǎng)瓶破損、有液溢出及細(xì)胞有污染，請(qǐng)拍照后及時(shí)聯(lián)系我們。

　　2）請(qǐng)?jiān)?或5X顯微鏡下確認(rèn)細(xì)胞狀態(tài)，同時(shí)給剛收到的細(xì)胞拍照（10×，20×）各2-3張以及培養(yǎng)瓶外觀照片一張留存，作為售后時(shí)收到時(shí)細(xì)胞狀態(tài)的依據(jù)。

　　3）貼壁細(xì)胞：細(xì)胞在37℃培養(yǎng)箱中放置2-3h，顯微鏡下觀察細(xì)胞的生長(zhǎng)和貼壁情況，有些貼壁細(xì)胞在快遞運(yùn)送過(guò)程中會(huì)因振動(dòng)脫落和脫落后成團(tuán)的情況。若鏡下觀察細(xì)胞的生長(zhǎng)密度若在60%以下，可去除培養(yǎng)瓶中灌液培養(yǎng)基（若有未貼壁的細(xì)胞需要離心回收，重懸打入到原培養(yǎng)瓶中）,加入新配制的完全培養(yǎng)基6-8mL，放到細(xì)胞培養(yǎng)箱中繼續(xù)培養(yǎng)。若細(xì)胞生長(zhǎng)密度達(dá)70%-80%以上，可以對(duì)細(xì)胞進(jìn)行傳代處理。傳代過(guò)程中，若因運(yùn)輸振動(dòng)脫落的細(xì)胞需要離心回收。

　　4）備注：運(yùn)輸用的培養(yǎng)基（灌液培養(yǎng)基）不能再用來(lái)培養(yǎng)細(xì)胞，請(qǐng)換用按照說(shuō)明書細(xì)胞培養(yǎng)條件新配制的完全培養(yǎng)基來(lái)培養(yǎng)細(xì)胞。收到細(xì)胞后第一次傳代建議T25培養(yǎng)瓶1：2傳代。

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