貨源介紹
細(xì)胞名稱 人胰腺導(dǎo)管癌細(xì)胞PK-1
產(chǎn)品規(guī)格 T25培養(yǎng)瓶x1 1.5ml凍存管x2
細(xì)胞數(shù)量 1x10^6 1x10^6
保存溫度 37℃-198℃
運(yùn)輸方式 常溫保溫運(yùn)輸干冰運(yùn)輸
安全等級(jí)1
用途限制 僅供科研1類
培養(yǎng)體系
DMEM高糖培養(yǎng)基+10%FBS+1%雙抗
培養(yǎng)溫度 37℃
二氧化碳濃度 5%
簡(jiǎn)介
人胰腺導(dǎo)管癌細(xì)胞PK-1細(xì)胞取自男性供體,為肝臟轉(zhuǎn)移株。貼壁培養(yǎng),不規(guī)則樣。
注釋
Part of:Cancer Cell Line Encyclopedia(CCLE)project.
Part of:NCI RAS program mutant KRAS cell line panel.
Doubling time:48 hours(PubMed=3547771;PubMed=6205469);24.1 hours(PubMed=8872523).
Omics:Deep exome analysis.
Omics:Deep RNAseq analysis.
Omics:Metabolome analysis.
Omics:SNP array analysis.
Omics:Transcriptome analysis.
STR信息
Amelogenin X,Y
CSF1PO 12
D3S1358 15
D5S818 11,12
D7S820 11
D8S1179 10,15
D13S317 9,10
D16S539 12
D18S51 13
D21S11 31
FGA 22,24
Penta D 9
Penta E 9,20
TH01 9,10(PubMed=25877200;RCB)
9(TKG)
TPOX 9,11
vWA 15,19
參考文獻(xiàn)
PubMed=26216984;DOI=10.1073/pnas.1501605112
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Metabolite profiling stratifies pancreatic ductal adenocarcinomas into subtypes with distinct sensitivities to metabolic inhibitors.
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Next-generation characterization of the Cancer Cell Line Encyclopedia.
Nature 569:503-508(2019)
驗(yàn)收細(xì)胞注意事項(xiàng)
1、收到大鼠回腸上皮細(xì)胞IEC-18細(xì)胞,請(qǐng)查看瓶子是否有破裂,培養(yǎng)基是否漏出,是否渾濁,如有請(qǐng)盡快聯(lián)系。
2、收到大鼠回腸上皮細(xì)胞IEC-18細(xì)胞,如包裝完好,請(qǐng)?jiān)陲@微鏡下觀察細(xì)胞。,由于運(yùn)輸過(guò)程中的問(wèn)題,細(xì)胞培養(yǎng)瓶中的貼壁細(xì)胞有可能從瓶壁中脫落下來(lái),顯微鏡下觀察會(huì)出現(xiàn)細(xì)胞懸浮的情況,出現(xiàn)此狀態(tài)時(shí),請(qǐng)不要打開細(xì)胞培養(yǎng)瓶,應(yīng)立即將培養(yǎng)瓶置于細(xì)胞培養(yǎng)箱里靜止3-5小時(shí)左右,讓細(xì)胞先穩(wěn)定下,再于顯微鏡下觀察,此時(shí)多數(shù)細(xì)胞會(huì)重新貼附于瓶壁。如細(xì)胞仍不能貼壁,請(qǐng)用臺(tái)盼藍(lán)染色法鑒定細(xì)胞活力,如臺(tái)盼藍(lán)染色證實(shí)細(xì)胞活力正常請(qǐng)按懸浮細(xì)胞的方法處理。
3、收到大鼠回腸上皮細(xì)胞IEC-18細(xì)胞后,請(qǐng)鏡下觀察細(xì)胞,用恰當(dāng)方式處理細(xì)胞。若懸浮的細(xì)胞較多,請(qǐng)離心收集細(xì)胞,接種到一個(gè)新的培養(yǎng)瓶中。棄掉原液,使用新鮮配制的培養(yǎng)基,使用進(jìn)口胎牛血清。剛接到細(xì)胞,若細(xì)胞不多時(shí)血清濃度可以加到15%去培養(yǎng)。若細(xì)胞迏到80%左右,血清濃度還是在10%。
4、收到大鼠回腸上皮細(xì)胞IEC-18細(xì)胞時(shí)如無(wú)異常情況,請(qǐng)?jiān)陲@微鏡下觀察細(xì)胞密度,如為貼壁細(xì)胞,未超過(guò)80%匯合度時(shí),將培養(yǎng)瓶中培養(yǎng)基吸出,留下5-10ML培養(yǎng)基繼續(xù)培養(yǎng):超過(guò)80%匯合度時(shí),請(qǐng)按細(xì)胞培養(yǎng)條件傳代培養(yǎng)。如為懸浮細(xì)胞,吸出培養(yǎng)液,1000轉(zhuǎn)/分鐘離心3分鐘,吸出上清,管底細(xì)胞用新鮮培養(yǎng)基懸浮細(xì)胞后移回培養(yǎng)瓶。
5、將培養(yǎng)瓶置于37℃培養(yǎng)箱中培養(yǎng),蓋子微微擰松。吸出的培養(yǎng)基可以保存在滅菌過(guò)的瓶子里,存放于4℃冰箱,以備不時(shí)之需。
6、24小時(shí)后,大鼠回腸上皮細(xì)胞IEC-18細(xì)胞形態(tài)已恢復(fù)并貼滿瓶壁,即可傳代。(貼壁細(xì)胞)將培養(yǎng)瓶里的培養(yǎng)基倒去,加3-5ml(以能覆蓋細(xì)胞生長(zhǎng)面為準(zhǔn))PBS或Hanks’液洗滌后棄去。加0.5-1ml 0.25%含EDTA的胰酶消化,消化時(shí)間以具體細(xì)胞為準(zhǔn),一般1-3分鐘,不超過(guò)5分鐘。可以放入37℃培養(yǎng)箱消化。輕輕晃動(dòng)瓶壁,見細(xì)胞脫落下來(lái),加入3-5ml培養(yǎng)基終止消化。用移液管輕輕吹打瓶壁上的細(xì)胞,使之完全脫落,然后將溶液吸入離心管內(nèi)離心,1000rpm/5min。棄上清,視細(xì)胞數(shù)量決定分瓶數(shù),一般一傳二,如細(xì)胞量多可一傳三,有些細(xì)胞不易傳得過(guò)稀,有些生長(zhǎng)較快的細(xì)胞則可以多傳幾瓶,以具體細(xì)胞和經(jīng)驗(yàn)為準(zhǔn)。(懸浮細(xì)胞)用移液管輕輕吹打瓶壁,直接將溶液吸入離心管離心即可。
7、貼壁細(xì)胞,懸浮細(xì)胞。嚴(yán)格無(wú)菌操作。換液時(shí),換新的細(xì)胞培養(yǎng)瓶和換新鮮的培養(yǎng)液,37℃,5%CO2培養(yǎng)。
特別提醒:原瓶中培養(yǎng)基不宜繼續(xù)使用,請(qǐng)更換新鮮培養(yǎng)基培養(yǎng)。