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Renca[RenCa]小鼠腎癌細胞細胞購買

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所在地區:湖北 時間:2023-12-07【加入收藏夾】【關閉

貨源介紹

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  名稱:Renca[RenCa](小鼠腎癌細胞)(種屬鑒定正確)

  別稱:Renca;RENCA;Renal Carcinoma

  年齡(性別)6周齡

  組織來源:腎臟

  生長特性:貼壁細胞

  細胞形態:上皮細胞樣

  生物安全等級:1

  生長培養基:RPMI-1640+10%FBS+1%P/S+0.1mM NEAA+1mM Sodium Pyruvate)+2mM L-glutamine

  推薦傳代比例:1:3-1:4

  推薦換液頻率:2~3次/周

  凍存條件

  凍存液:55%基礎培養基+40%FBS+5%DMSO

  溫度:液氮

  培養條件

  氣相:空氣,95%;CO2,5%

  溫度:37℃

  保藏機構ATCC;CRL-2947

  細胞接收后的處理

  1)收到細胞后,75%酒精消毒瓶壁將T25瓶置于37℃培養箱放置約2-3h,若發現培養瓶破損、有液溢出及細胞有污染,請拍照后及時聯系我們。

  2)請在4或5X顯微鏡下確認細胞狀態,同時給剛收到的細胞拍照(10×,20×)各2-3張以及培養瓶外觀照片一張留存,作為售后時收到時細胞狀態的依據。

  3)貼壁細胞:細胞在37℃培養箱中放置2-3h,顯微鏡下觀察細胞的生長和貼壁情況,有些貼壁細胞在快遞運送過程中會因振動脫落和脫落后成團的情況。若鏡下觀察細胞的生長密度若在60%以下,可去除培養瓶中灌液培養基(若有未貼壁的細胞需要離心回收,重懸打入到原培養瓶中),加入新配制的完全培養基6-8mL,放到細胞培養箱中繼續培養。若細胞生長密度達70%-80%以上,可以對細胞進行傳代處理。傳代過程中,若因運輸振動脫落的細胞需要離心回收。

  4)備注:運輸用的培養基(灌液培養基)不能再用來培養細胞,請換用按照說明書細胞培養條件新配制的完全培養基來培養細胞。收到細胞后第一次傳代建議T25培養瓶1:2傳代。

  細胞培養方法

  1)凍存細胞的復蘇:

  將含有1mL細胞懸液的凍存管在37℃水浴中迅速搖晃解凍,加入到含4-6mL完全培養基的離心管中混合均勻。在1000RPM條件下離心3-5min,棄去上清液,完全培養基重懸細胞。然后將細胞懸液加入含6-8ml完全培養基的培養瓶(或皿)中37℃培養過夜。第二天顯微鏡下觀察細胞生長情況和細胞密度。

  2)細胞傳代:如果細胞密度達80%-90%,即可進行傳代培養。

  對于貼壁細胞傳代可以參考以下方法

  1.棄去培養上清,用不含鈣、鎂離子的PBS潤洗細胞1-2次。

  2.加入0.25%(w/v)胰蛋白酶-0.53 mM EDTA于培養瓶中(T25瓶1-2mL,T75瓶2-3mL),置于37℃培養箱中消化1-2分鐘(難消化的細胞可以適當延長消化時間),然后在顯微鏡下觀察細胞消化情況,若細胞大部分變圓并脫落,迅速拿回操作臺,輕敲幾下培養瓶后加入3-4ml含10%FBS的培養基來終止消化。

  3.輕輕打勻后吸出,在1000RPM條件下離心3-5min,棄去上清液,補加1-2mL培養液后吹勻。將細胞懸液按1:2的比例分到新T25瓶中,添加6-8ml按照說明書要求配置的新的完全培養基以保持細胞的生長活力,后續傳代根據實際情況按1:2~1:5的比例進行。

  3)細胞凍存:收到細胞后建議在培養前3代時凍存一批細胞種子以備后續實驗使用。

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