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貨源介紹

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　　質粒載體網是質粒構建及應用研究的專業平臺,提供質粒構建和應用技術的最新進展和實用方法,為科研人員提供質粒相關研究的最新動態和資源支持.

　　細胞名稱：人腦微血管內皮細胞HBMEC

　　產品規格：T25培養瓶x1；1.5ml凍存管x2

　　細胞數量：1x10^6；1x10^6

　　保存溫度：37℃；-198℃

　　運輸方式：常溫保溫運輸；干冰運輸

　　安全等級：1

　　用途限制：僅供科研3類

　　培養體系：DMEM高糖培養基（Hyclone）+10%胎牛血清（Gibco）+1%雙抗（Hyclone）

　　培養溫度：37℃

　　二氧化碳濃度：5%

　　簡介：人腦微血管內皮細胞HBMEC細胞取自女性供體，貼壁培養，不規則形態。

　　注釋：倍增時間67h。

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　　參考文獻

　　槲皮素對脂多糖誘導人腦微血管內皮細胞的作用機制秦劭晨;王愛梅;張晉岳;李若瑜;李萬婷湖南師范大學自然科學學報

　　鎮心省睡益智方抗Aβ25-35誘導人腦微血管內皮細胞損傷的作用吳玲;鄭琴;郭園園;張科楠;羅俊中國實驗方劑學雜志

　　驗收細胞注意事項

　　1、收到人腦微血管內皮細胞HBMEC細胞，請查看瓶子是否有破裂，培養基是否漏出，是否渾濁，如有請盡快聯系。

　　2、收到人腦微血管內皮細胞HBMEC細胞，如包裝完好，請在顯微鏡下觀察細胞。,由于運輸過程中的問題，細胞培養瓶中的貼壁細胞有可能從瓶壁中脫落下來，顯微鏡下觀察會出現細胞懸浮的情況，出現此狀態時，請不要打開細胞培養瓶，應立即將培養瓶置于細胞培養箱里靜止3-5小時左右，讓細胞先穩定下，再于顯微鏡下觀察，此時多數細胞會重新貼附于瓶壁。如細胞仍不能貼壁，請用臺盼藍染色法鑒定細胞活力，如臺盼藍染色證實細胞活力正常請按懸浮細胞的方法處理。

　　3、收到人腦微血管內皮細胞HBMEC細胞后，請鏡下觀察細胞，用恰當方式處理細胞。若懸浮的細胞較多，請離心收集細胞，接種到一個新的培養瓶中。棄掉原液，使用新鮮配制的培養基，使用進口胎牛血清。剛接到細胞，若細胞不多時血清濃度可以加到15％去培養。若細胞迏到80%左右，血清濃度還是在10％。

　　4、收到人腦微血管內皮細胞HBMEC細胞時如無異常情況，請在顯微鏡下觀察細胞密度，如為貼壁細胞，未超過80%匯合度時，將培養瓶中培養基吸出，留下5-10ML培養基繼續培養：超過80%匯合度時，請按細胞培養條件傳代培養。如為懸浮細胞，吸出培養液，1000轉/分鐘離心3分鐘，吸出上清，管底細胞用新鮮培養基懸浮細胞后移回培養瓶。

　　5、將培養瓶置于37℃培養箱中培養，蓋子微微擰松。吸出的培養基可以保存在滅菌過的瓶子里，存放于4℃冰箱，以備不時之需。

　　6、24小時后，人腦微血管內皮細胞HBMEC細胞形態已恢復并貼滿瓶壁，即可傳代。（貼壁細胞）將培養瓶里的培養基倒去，加3-5ml（以能覆蓋細胞生長面為準）PBS或Hanks’液洗滌后棄去。加0.5-1ml 0.25%含EDTA的胰酶消化，消化時間以具體細胞為準，一般1-3分鐘，不超過5分鐘。可以放入37℃培養箱消化。輕輕晃動瓶壁，見細胞脫落下來，加入3-5ml培養基終止消化。用移液管輕輕吹打瓶壁上的細胞，使之完全脫落，然后將溶液吸入離心管內離心，1000rpm/5min。棄上清，視細胞數量決定分瓶數，一般一傳二，如細胞量多可一傳三，有些細胞不易傳得過稀，有些生長較快的細胞則可以多傳幾瓶，以具體細胞和經驗為準。（懸浮細胞）用移液管輕輕吹打瓶壁，直接將溶液吸入離心管離心即可。

　　7、貼壁細胞，懸浮細胞。嚴格無菌操作。換液時，換新的細胞培養瓶和換新鮮的培養液，37℃，5%CO2培養。

　　特別提醒：原瓶中培養基不宜繼續使用，請更換新鮮培養基培養。