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NCI-H1915人非小細胞肺癌細胞zlzt生物

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所屬分類:商務服務
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所在地區:湖北 時間:2023-11-07【加入收藏夾】【關閉

貨源介紹

  質粒載體網主要對載體質粒類目下產品展示,不僅提供質粒、菌種、細胞及培養基等相關產品訂購,同時可以為客戶提供質粒構建、載體設計及菌種細胞鑒定,還對包括ATCC、JCM、KCTC等進口微生物資源提供訂購及保藏服務。

  種屬人源細胞系/肺、氣管、支氣管

  到貨周期10-15個工作日

  NCI-H1915人非小細胞肺癌細胞株建于1988年4月,源于一個腦轉移病人。

  細胞特性

  1)來源:肺癌,腦轉移

  2)形態:上皮細胞樣

  3)含量:>1x10e6個/mL

  4)污染:支原體、細菌、酵母和真菌檢測為陰性

  5)規格:T25瓶或者1mL凍存管包裝

  運輸和保存:使用含有優質胎牛血清的2ml凍存管發送存活細胞。收到細胞后,可在1000RPM,常溫條件下,離心5min后,于潔凈操作臺棄去上清,加入推薦使用的培養基后轉移至10cm培養皿或者T25培養瓶中培養,傳代達到細胞生長狀態良好時,再進行凍存。具體操作見細胞培養步驟。

  細胞用途:僅供科研使用。

  細胞培養步驟

  一.培養基及培養凍存條件準備:

  1)準備RPMI-1640培養基(添加NaHCO3 1.5g/L,D-葡萄糖2.5g/L,丙酮酸鈉0.11g/L),90%;優質胎牛血清,10%。

  2)培養條件:氣相:空氣,95%;二氧化碳,5%。溫度:37攝氏度,培養箱濕度為70%-80%。

  3)凍存液:90%完全培養基,10%DMSO,現用現配。液氮儲存。

  二.細胞處理:

  1)復蘇細胞:將含有1mL細胞懸液的凍存管在37℃水浴中迅速搖晃解凍,加入4mL培養基混合均勻。在1000RPM條件下離心4分鐘,棄去上清液,補加1-2mL培養基后吹勻。然后將所有細胞懸液加入培養瓶中培養過夜(或將細胞懸液加入10cm皿中,加入約8ml培養基,培養過夜)。第二天換液并檢查細胞密度。

  2)細胞傳代:如果細胞密度達80%-90%,即可進行傳代培養。

  對于貼壁細胞,傳代可參考以下方法:

  1.棄去培養上清,用不含鈣、鎂離子的PBS潤洗細胞1-2次。

  2.加2ml消化液(0.25%Trypsin-0.53mM EDTA)于培養瓶中,置于37℃培養箱中消化1-2分鐘,然后在顯微鏡下觀察細胞消化情況,若細胞大部分變圓并脫落,迅速拿回操作臺,輕敲幾下培養瓶后加少量培養基終止消化。

  3.按6-8ml/瓶補加培養基,輕輕打勻后吸出,在1000RPM條件下離心4分鐘,棄去上清液,補加1-2mL培養液后吹勻。

  4.將細胞懸液按1:2到1:5的比例分到新的含8ml培養基的新皿中或者瓶中。

  3)細胞凍存:待細胞生長狀態良好時,可進行細胞凍存。貼壁細胞凍存時,棄去培養基后加入少量胰酶,細胞變圓脫落后,加入約1ml含血清的培養基后加入凍存管中,再添加10%DMSO后進行凍存。

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